无菌查验8大常用培养基的制备
1.硫乙醇酸盐流体培养基
胰酪胨 15.0g、酵母浸出粉 5.0g、葡萄糖/无水葡萄糖 5.5g/5.0g、氯化钠 2.5g、L-胱氨酸 0.5g、新配制的0.1%刃天青溶液 1.0 mL、硫乙醇酸钠 0.5g(或硫乙醇酸 0.3mL)、琼脂 0.75g、水 1000 mL
除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述因素殽杂,微温溶解,调治pH为弱碱性,煮沸,滤清,到场葡萄糖和刃天青溶液,摇匀,调治pH,使灭菌后在25℃的pH值为7.1±0.2。分装至相宜的容器中,其装量与容器高度的比例应切合培养完毕后培养基氧化层(粉赤色)不凌驾培养基深度的 1/2。灭菌。在供试品接种前,培养基氧化层的高度不得凌驾培养基深度的1/3 ,不然,须经 100℃水浴加热至粉赤色散失(不凌驾 20 分钟),敏捷冷却,只限加热一次,并避免被沾染。
除尚有划定外,硫乙醇酸盐流体培养基置 (30~35)℃培养。
2.胰酪大豆胨液体培养基
胰酪胨 17.0g、氯化钠 5.0g、大豆木瓜卵白酶水解物 3.0g、磷酸氢二钾 2.5g、葡萄糖/无水葡萄糖 2.5g/2.3g、水 1000 mL
除葡萄糖外,取上述因素,殽杂,微温溶解,滤过,调治pH使灭菌后在25℃的pH值为7.3±0.2,到场葡萄糖,分装,灭菌。
胰酪大豆胨液体培养基置(20~25)℃培养。
3.中和或灭活用培养基
按上述硫乙醇酸盐流体培养基或胰酪大豆胨液体培养基的处方及制法,在培养基灭菌或使用前到场相宜的中和剂、灭活剂或外表活性剂,其用量同办法实用性实验。
4.0.5%葡萄糖肉汤培养基(用于硫酸链霉素等抗生素的无菌查验)
胨 10.0g、氯化钠 5.0g、牛肉浸出粉 3.0g、葡萄糖 5.0g、水 1000 mL。
除葡萄糖外,取上述因素殽杂,微温溶解,调治pH为弱碱性,煮沸,到场葡萄糖溶解后,摇匀,滤清,调治pH使灭菌后在25℃的pH值为 7.2±0.2,分装,灭菌。
5.胰酪大豆胨琼脂培养基
胰酪胨 15.0g、氯化钠 5.0g、大豆木瓜卵白酶水解物 5.0g、琼脂 15.0g、水1000 mL。
除琼脂外,取上述因素,殽杂,微温溶解,调治pH使灭菌后在25℃的pH值为7.3±0.2,到场琼脂,加热溶化后,摇匀,分装,灭菌。
6.沙氏葡萄糖液体培养基
生物构造胃卵白酶水解物和胰酪胨等量殽杂物 10.0g、葡萄糖 20.0g、水 1000 mL。
除葡萄糖外,取上述因素,殽杂,微温溶解,调治pH使灭菌后在25℃的pH值为5.6±0.2,到场葡萄糖,摇匀,分装,灭菌。
7.沙氏葡萄糖琼脂培养基
生物构造胃卵白酶水解物和胰酪胨等量殽杂物 10.0g、琼脂15.0g、葡萄糖 40.0g、水 1000 mL。
除葡萄糖、琼脂外,取上述因素,殽杂,微温溶解,调治pH使灭菌后在25℃的pH值为5.6±0.2,到场琼脂,加热溶化后,再到场葡萄糖,摇匀,分装,灭菌。
8.马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)
马铃薯(去皮) 200g、琼脂 14.0g、葡萄糖 20.0g、水 1000 mL。
取马铃薯,切成小块,加水1000 mL,煮沸20~30分钟,用6~8层纱布过滤,取滤液补水至1000 mL,调治pH使灭菌后在25℃的pH值为5.6±0.2,到场琼脂,加热溶化后,再到场葡萄糖,摇匀,分装,灭菌。
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