PDA培养基的制造办法

马铃薯葡萄糖琼脂培养基是使用最经常的培养基，简称PDA，主要用于真菌的分散和培养，偶尔也用于植物病原细菌的培养。

PDA培养基(马铃薯葡萄糖培养基)配方：去皮马铃薯200g 葡萄糖20g琼脂15—20g蒸馏水1000ml 天然pH。在PDA培养基配方中也可用蔗糖代替葡萄糖，如此配制的培养基也称为PSA培养基。

(1)称量。称量去皮马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15--20g。提示：琼脂到场的量取决于琼脂的质量，质量好的15g就够了，质量差的应得当增长。别的，在炎天气温较高时，得当增长用量。

(2)将马铃薯切成小块，放入锅中，加水1000ml，煮沸20~30min。用纱布滤去马铃薯残渣。

(3)将马铃薯滤液放回锅中，到场琼脂，加热熔化。提示：在琼脂熔化的历程中，必要用玻璃棒不休搅拌，并控制火力不要使培养基溢出或烧焦。

(4)到场葡萄糖。葡萄糖溶解后，到场过量的水以增补加热历程中丧失的水分，定容至1000ml。提示：通常在制造培养基的锅内用红蓝铅笔标志出不同体积的刻度，如1000ml、2000ml等，在定容时直接将水加至已标志的刻度即可。

(5)分装。依据不同的实行目标，可将配制的培养基分装于试管内或三角瓶内。分装试管，其量为管高的1／5，灭菌后制成斜面。分装三角瓶的容量以不凌驾三角瓶容积之一半为宜。

(6)加塞。在管口或瓶口塞上棉塞。棉塞要用未脱脂的经弹松的棉花，棉塞可过滤氛围，避免杂菌侵入并可减缓培养基水分的蒸发，故在植物病理学研讨事情中广泛使用。

(7)包扎。加塞后，将试管用线绳捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以避免灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳扎好。用暗号笔注明培养基称呼、配制日期、组别、制造人等。

(8)灭菌。将上述培养基以0．103MPa，121℃，高压蒸气灭菌20~30min。可以用家用高压锅上汽后灭菌1小时。

(9)弃捐斜面。将灭菌的试管培养基冷至50℃支配(以防斜面上冷凝水太多)，将试管口端搁在玻棒或其他切合高度的器具上，弃捐的斜面长度以不凌驾试管总长的一半为宜。

培养基经灭菌后，必需放在37C温箱培养24h，或常温下安排几天后无菌生父老方可使用。

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