LB培养基(常见的微生物培养基)
稀有的微生物培养基
培养基,是指需求微生物、植物或生物(或构造)生长繁衍的,由不同养分物质组合配制而成的养分基质。寻常都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包含微量元素)、维生素和水等几大类物质。而此中微生物培养基依据微生物的品种和实行目标不同也有不同的品种和配制办法,底下先容几种稀有的微生物培养基。
1、养分琼脂培养基
养分琼脂培养基但是就是一种无选择性的较低养分因素的固体培养基,主要用于细菌菌落计数,也可以用于细菌的传代和增菌,但寻常不必于细菌的判定(除非该细菌菌落有比力特别的外形特性)。
养分琼脂培养基配方(每升):卵白胨10g,牛肉膏粉3g,氯化钠5g,琼脂15g,终极pH 7.3±0.2。卵白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源,氯化钠能维持均衡的浸透压,琼脂是培养基的凝结剂。
2、胰酪大豆胨琼脂培养基
胰酪大豆胨琼脂培养基又称为TSA培养基,是一种基本的非选择性培养基,含有胰酪卵白胨、大豆胨、氯化钠和琼脂因素,主要用作无菌查验及寻常微生物的培养。在国标中通常用来做医药产业干净室(区)沉降菌的测试。在待测地区内拔取测试点,将TSA平板掀开,安插在测试点,在氛围中暴露30min以上不等时间举行采样,然后培养举行菌落计数,不同的干净度品级要求不同的菌落数。
胰酪大豆胨琼脂培养基配方(每升):胰卵白胨(酪卵白胰酶消化物)15g、大豆卵白胨(大豆粉木瓜卵白酶消化物)5g、氯化钠5g、琼脂15g,终极pH7.3±0.2。
3、LB琼脂培养基
LB琼脂培养基为一种实行室中广泛使用的平凡培养基。主要因素为胰卵白胨、酵母提取物、琼脂、氯化钠。LB培养基通常用来培养基因工程受体菌(大肠杆菌),这类菌通常是颠末变革无法在外界情况单独存活和扩增的工程菌。培养这类工程菌,我们可以表达多量的外源卵白,因此LB培养基通常在基因工程、分子生物学中使用比力多。
LB琼脂培养基配方(每升):胰卵白胨10g,酵母提取物5g,氯化钠10g,琼脂15-20g,终极pH 7.4±0.2 。
4、PDA培养基
PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),分散对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。它属于固体培养基、半构成培养基。PDA培养基有利于微生物生长发育,并且节流质料,寻常在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面使用广泛。
PDA培养基配方(每升):土豆200g,葡萄糖20g,琼脂15-20g,天然pH。
5、伊红美蓝培养基
伊红美蓝培养基通常简称EMB medium,为弱选择性培养基,主要用于大肠杆菌和产气肠杆菌的分散和辨别,也实用于大肠菌群的分散培养。
伊红美蓝培养基配方(每升):卵白胨10g,乳糖10g,磷酸氢二钾2g、琼脂20-30g,2%伊红水溶液20ml,0.5%美蓝水溶液13ml
其配方中各主要因素的作用为:卵白胨提供碳源和氮源;乳糖是大肠菌群发酵的糖类;磷酸氢二钾是缓冲剂;琼脂是培养基凝结剂;伊红(Eosin Y)也称曙红或四澳荧光素,为酸性染料;美兰(eosin-methylene blue),也叫亚甲蓝(C16H18N3S.CI),为碱性染料,二者在培养基中均为指示剂。
其原理是:当大肠杆菌分析乳糖产酸时,细菌带正电,以是染上赤色,再与美兰团结而构成紫玄色菌落,并带有金属光晕;产气肠杆菌则呈棕色,很少有金属光晕,同时不分析乳糖的细菌,如沙门氏菌和志贺氏菌,则为无色或琥珀色半纯透菌落;凝结酶阳性葡萄球菌为无色针尖轻重的菌落;白色念珠菌则为蛛丝状或羽毛状菌落。
6、麦康凯琼脂培养基
麦康凯琼脂培养基简称为MAC培养基,具有中等强度选择性,抑菌才能略强,主要克制革兰氏阳性菌,但有少数革兰氏阴性菌也不生长,用于分散判定细菌的培养基。主要因素为卵白胨、脙胨、猪胆盐(或牛、羊胆盐) 氯化钠、琼脂、乳糖、1%结晶紫水溶液、0.5%中性红水溶液。
其原理是:胆盐可以克制革兰氏阳性菌的生长,对伤寒等沙门菌的生长有促进作用。中性红可以把能分析乳糖和不分析乳糖的细菌区分开,展现不同颜色。沙门菌及志贺菌呈无色菌落,大肠埃希菌呈桃赤色菌落。
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