质料酶之:Taq DNA聚合酶“大起底”以及它的特点与使用
关于长时泡在实行室的人来说,Taq DNA聚合酶一定是一个十分熟习的名词。它全称为TaqDNA聚合酶,主要使用于聚合酶链式反响(ploymerase chain reaction,PCR)中,是科研人最为常用的东西酶之一。
1969年,T.D Brock在美国黄石国度丛林公园火山温泉中率先发觉了一种水生栖热菌YT-1(Thermus aquaicus),Chien与Randal K等人先后在这种菌种告捷分散出Taq DNA聚合酶,随着其他更安定的菌种的发觉,以及PCR武艺的创造与推行,Taq DNA聚合酶渐渐站上科研“C位”。
为什么DNA聚合酶品种这么多,但仅有Taq DNA聚合酶能一直成为科研事情者的心头好呢?那就不得不偏重夸一下Taq DNA聚合酶出色的热安定性!Thermus aquaicus这种水生栖热菌生长在70-75℃矿物质丰厚的情况中,在它身上提取出的DNA聚合酶固然要比寻常的DNA聚合酶更耐热。Taq DNA聚合酶在93-95℃时仍有安定的酶活性,在75℃时酶活性最大,延伸听从约150个核苷酸每秒,反而温度低条件下,它的活性会分明低落,它的这种特性在必要低温情况的PCR反响中有紧张意义。
好的Taq DNA聚合酶对PCR实行后果至关紧张。三狮生物研产消费的2×Taq PCR Master Mix(Taq酶预混液含染料/Taq酶预混液不含染料)是DNA Ploymerase、PCR Buffer及dNTP Mix等PCR必要因素的2倍浓度的预混液,使用本产物时只必要添加模板、高明引物、卑劣引物和dd水便可举行PCR反响,简化了利用步调,低落了利用历程中的沾染风险,简简便单便可到达目标基因的准确定量。